双调蛋白对小鼠呼吸机相关性肺损伤的保护作用及机制研究

摘要：

目的 研究上皮生长因子双调蛋白( Amphiregulin,Areg)对呼吸机相关性肺损伤( ventilator-associated lung injury,VALI)肺组织的保护作用,并探讨其作用机制.方法 将C57BL/6小鼠根据随机数字表法随机分为8组:①对照组( Control组),每只腹腔注射磷酸盐缓冲液(PBS) 200 μL,维持正常呼吸;②Areg组,腹腔注射重组小鼠Areg蛋白( rmAreg),维持正常呼吸;③PBS+VALI组,腹腔注射PBS,30min后行机械通气;④Areg+VALI组,腹腔注射rmAreg,30 min后行机械通气;⑤DMSO+VA-LI组;⑥DMSO+Areg+VALI组,每只腹腔注射二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)100 μL,30 min后腹腔注射PBS或rmAr-eg,再经30 min后行机械通气;⑦AG1478+Areg+VALI组与⑧Perifosine+Areg+VALI组,每只腹腔注射AG1478 1 mg或Peri-fosine 1 mg,30 min后腹腔注射rmAreg,再经30 min后行机械通气.小鼠通过大潮气量机械通气(潮气量12 mL/kg,频率90次/分,通气4 h)制作VALI模型.机械通气24 h后行肺组织HE染色并观察病理学变化,检测支气管肺泡灌洗液( Bronchoal-veolar lavage fluid,BALF)中总蛋白、免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,IgM)、肿瘤坏死因子α-(Tumor necrosis factor,TNF-α)与白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)的浓度;机械通气6 h后检测肺组织中上皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor, EGFR)与蛋白激酶B(AKT)的磷酸化水平.结果 与0 h组[(62. 0 ± 19. 4) pg/mL]相比,VALI小鼠在机械通气结束3、6、12、24 h后BALF中的Areg浓度有明显升高,其中在6 h升高最为显著[(231. 8 ± 58. 7) pg/mL].与Control组相比,PBS+VALI组小鼠的肺组织肺泡壁增厚,炎症反应显著增加,而在Areg+VALI组中这些病理损伤均有明显减轻.与Control组相比,PBS+VALI组小鼠BALF中总蛋白、IgM、TNF-α与IL-6均有显著升高,而相较于PBS+VALI组,Areg+VALI组中这些指标有明显降低. rmAreg显著提高了VALI小鼠肺组织中EGFR与AKT的磷酸化水平. AG1478与Perifosine均明显抑制了rmAreg对VA-LI肺组织的作用效果.结论 小鼠发生VALI后肺组织中Areg的表达量显著增加. Areg通过EGFR-AKT信号通路减轻肺组织病理学变化、渗透性与炎症反应,因此在VALI中具有明显的保护作用.

关键词：呼吸机相关性肺损伤、双调蛋白、上皮生长因子受体、肺泡灌洗液、小鼠

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资助基金：湖北省科技计划项目2017CFB387

在线出版日期：2019-06-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1082-1087