10.3969/j.issn.1009-6469.2016.09.006
不同浓度瑞芬太尼对新生大鼠海马区神经干细胞内钙浓度及细胞凋亡的影响
目的:探讨不同浓度瑞芬太尼对新生大鼠海马区神经干细胞凋亡及细胞内钙浓度的影响。方法采用已建立的新生SD 大鼠海马区神经干细胞单细胞克隆系细胞株,将5×108个·L -1活细胞的密度均匀地接种到的12孔培养板中,每孔加入1 mL 含有10%胎牛血清的 DMEM/F12的培养基,放入温度37℃、5%浓度 CO2培养箱中孵育24 h,镜下观察细胞球贴壁后,每孔分别加入生理盐水或不同浓度的瑞芬太尼(R),分为以下4组:(1)对照组,每孔加入生理盐水;(2)低浓度组,每孔加入瑞芬太尼5μg·L -1,即 R5组;(3)中浓度组,每孔加入瑞芬太尼10μg·L -1,即 R10组;(4)高浓度组,每孔加入瑞芬太尼20μg ·L -1,即 R20组。每组重复4次。加药后培养300、600、900 s 用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测各组神经干细胞内游离钙浓度的动态变化,24 h 后流式细胞仪检测各组神经干细胞的凋亡情况。结果(1)各组细胞内钙浓度变化情况:与对照组比较,R5组细胞内钙浓度差异无统计学意义(P >0.05);R10、R20组细胞内钙浓度明显升高(其中 R10组 P <0.05,R20组 P <0.01)。(2)各组神经干细胞凋亡变化情况:与对照组比较,R5组神经干细胞凋亡差异无统计学意义(P >0.05);R10、R20组神经干细胞凋亡明显升高(其中 R10组 P <0.05,R20组 P <0.01)。结论低浓度的临床有效血药浓度的瑞芬太尼对新生大鼠海马区神经干细胞内钙浓度、细胞凋亡没有影响,中高浓度的临床有效血药浓度的瑞芬太尼应用使细胞内钙浓度显著升高,从而诱发细胞大量凋亡。
瑞芬太尼、海马、神经干细胞、细胞凋亡、钙、大鼠、Sprague-Dawley
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R96;R74
湖北省自然科学基金项目2012FFC060;湖北省省级重点学科项目2014XKJSSJ04
2016-10-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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