靶向 survivin 基因的小干扰 RNA 对食管癌细胞Eca －109化疗敏感性的影响

摘要：

目的：利用 RNAi （RNA interference， RNAi）技术抑制食管癌 Eca －109细胞 survivin 基因表达，观察 survivin 基因沉默后对 Eca －109细胞化疗敏感性的影响。方法构建靶向 survivin 基因特定序列的小干扰 RNA（small interference RNA， siRNA）真核表达载体并转染 Eca －109细胞，筛选得到稳定转染的 survivin 干扰组细胞 Eca －109／si －survivin，同时设转染无关干扰质粒的 Eca －109细胞为阴性对照组，未转染的 Eca －109细胞为空白对照组；通过 Western Blot 法检测干扰前后 survivin 基因沉默抑制效果；随后将各组细胞与不同浓度的氟尿嘧啶（5－Fu）作用，MTT 法检测各组细胞对5－Fu 的半数抑制浓度（IC50），流式细胞仪分析各组细胞的凋亡率。结果干扰组 Eca －109／si －survivin 细胞 survivin 蛋白表达水平（18．75±3．12）较阴性对照组 Eca －109／si －control（44．17±3．15）及空白对照组 Eca －109（46．20±2．62）明显下调（P ＜0．05）；联合应用5－Fu 的Eca －109／si －survivin 干扰组细胞 IC50为（18．75±1．53）mg? L－1，显著低于空白对照组（39．65±1．75）mg? L－1和阴性对照组（38．95±1．34）mg? L－1，差异具有统计学意义（P ＜0．05）；联合应用5－Fu 的 Eca －109／si －survivin 干扰组细胞凋亡率为（37．35±1．52）％，明显高于空白对照组（11．26±1．21）％和阴性对照组（12．34±1．32）％，差异具有显著性（P ＜0．05）。结论靶向 survivin 的 siRNA 能特异性沉默 survivin 基因表达，抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡，并增强人食管癌 Eca －109细胞对5－Fu 的化疗敏感性。

关键词：小干扰 RNA、survivin 基因、Eca-109 细胞、化疗敏感性

所属期刊栏目：20

分类号：R73;R5

资助基金：河南省教育厅科学技术研究重点项目14B310002

在线出版日期：2016-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：683-686