基于活细胞显微技术的登革病毒膜融合实验方法的建立及初步应用

摘要：

目的 建立一种基于活细胞显微技术的膜融合实验方法,分析抗体在登革病毒(Dengue virus,DENV)包膜糖蛋白E(envelope glycoprotein)介导的细胞膜融合中的作用.方法 DENV感染C6/36蚊子细胞,48 h后酸化细胞内涵体环境以诱导病毒与细胞发生膜融合,同时加入不同稀释浓度的中和抗体;观察抗体在病毒一宿主细胞膜融合中所起到的作用;借助IncellAnalyzer 2000高内涵细胞成像分析系统拍摄图片并用软件进行定量分析.结果 在宿主细胞内涵体环境酸性化(pH值6.0)后的100 min时能清晰地观察到登革病毒与C6/36细胞发生膜融合;中和抗体4G2及9F12均能抑制膜融合(IC50分别为0.02、0.03 g·L-1),最终中和登革病毒感染.结论 运用此方法,能测定登革病毒抗体的膜融合抑制能力,从而了解其中和作用机制.

关键词：登革病毒、中和抗体、膜融合

所属期刊栏目：19

分类号：R31;R39

资助基金：安徽省自然科学基金青年科学基金项目1508085QH176

在线出版日期：2016-02-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2127-2130