原花青素联合Apollon siRNA抑制肝癌HepG2细胞增殖及凋亡

摘要：

目的 研究原花青素联合凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis proteins,IAPs)家族成员Apollon小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对人肝癌(HepG2)细胞增殖、凋亡的影响.方法 设计并合成Apollon siRNA的序列,将一定浓度的人工合成的Apollon siRNA经脂质体包裹转染肝癌(HepG2)细胞,运用实时荧光定量RT-PCR检测Apollon mRNA的表达水平,蛋白质免疫印记技术检测Apollon的蛋白表达水平,并筛选出Apollon siRNA的有效序列,并进一步联合不同浓度的原花青素作用于肝癌(HepG2)细胞48 h后,采用WST-8法检测单用Apollon siRNA、单用原花青素、及Apollon siRNA联合原花青素对肝癌细胞增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞早期凋亡率;Hoechst 33258染色观察HepG2细胞凋亡形态.结果 设计的三对Apollon siRNA序列,筛选出其中有一对(NO.2)能明显下调Apollon mRNA与蛋白的表达水平,Apollon siRNA联合原花青素作用于HepG2细胞48 h后,单用原花青素的IC50为25.24 mg·L-1;Apollon siRNA与原花青素联合使用,原花青素的IC50为9.99 mg·L-1,增敏倍数为2.53,表现为协同作用.流式细胞术检测结果 显示:Apollon siRNA联合原花青素能促进HepG2细胞凋亡,其早期凋亡率达25.2%;经荧光显微镜观察,Apollon siRNA组可见核高强度荧光的细胞,并见凋亡小体.结论 Apollon siRNA可增强肝癌细胞对原花青素的敏感性,作用机制可能为共同促进肝癌细胞早期凋亡有关,为临床上肝癌的治疗提供理论基础.

关键词：Apollon、小干扰RNA、原花青素、HepG2细胞、肝癌

所属期刊栏目：17

分类号：R73;R44

资助基金：广州市番禺区科技计划项目2011-Z-03-24

在线出版日期：2013-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：552-555