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10.3969/j.issn.1009-6469.2012.07.021

阻断Notch信号途径能有效抑制A549细胞增殖

引用
目的 Delta-like 4(DLL4)是Notch信号通路的配体之一,是近年新发现的血管生长调控因子,研究表明DLL4的高表达与肺腺癌转移预后密切相关.该文旨在研究DLL4在A549细胞中的表达,以及DLL4基因表达对人A549细胞增殖与凋亡的影响.方法 (1)体外培养A549细胞,免疫细胞化学法检测DLL4在A549细胞中的表达及定位;(2)设计并化学合成靶向DLL4基因的siRNA序列,lipofectamineTM2000介导DLL4 siRNA转染A549细胞,RT-PCR进行DLL4-mRNA定量,Western blot分别检测A549细胞DLL4蛋白的改变;(3)四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞的存活和生长变化;(4)激光共聚焦显微镜检测Annexin V-FITC标记的A549细胞的细胞凋亡比率.结果 (1)A549细胞表达DLL4蛋白,且定位于胞浆中;(2)DLL4-mRNA和DLL4蛋白的表达在对照组与干扰组之间有显著差异(P<0.05);(3)MTT检测显示抑制DLL4表达对A549细胞的增殖有抑制作用,DLL4干扰组细胞增殖抑制率为43.85%,未处理组细胞增殖抑制率为23.81%;(4)抑制DLL4基因表达,A549细胞的凋亡比率明显升高,DLL4干扰组细胞凋亡率为(25.01±4.32)%,未处理组细胞凋亡率为(14.24±0.98)%.结论 DLL4在A549细胞表达.特异性阻断DLL4/Notch信号途径能有效抑制A549细胞增殖,促进细胞凋亡.

DLL4、RNA干扰、A549细胞、细胞增殖、细胞凋亡

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R73;R44

湖北省教育厅重点项目D20102103;十堰市科技项目十科发2010-047S,十科通[2006]18K33,十科发[2009]29S43;湖北医药学院研究生启动金2009QDJ06,2005QDJ08

2012-07-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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