肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的原核表达、纯化及抗肿瘤活性研究

摘要：

目的 研究rhTRAIL114-281在大肠杆菌中的表达及其纯化产物对肿瘤细胞的生长抑制作用.方法 将经过酶切鉴定的原核表达载体pET-23d(+)/TRAIL114-281转化入宿主菌E.coli w3110,优化目标蛋白表达条件,用离子交换色谱法纯化.目标蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定,HPLC检测纯化蛋白纯度,最终用MTT法检测其生物学活性.结果 rhTRAIL蛋白最高表达量可占菌体总蛋白的50%以上,可溶性形式存在的目标蛋白约占上清总蛋白的25%,离子交换纯化后,可溶形式rhTRAIL 对人口腔癌细胞KBV200有明显的生长抑制作用.结论 rhTRAIL蛋白可在转化了重组质粒pET-23d(+)/TRAIL114-281的宿主菌E.coli w3110中高效表达,纯化所得的可溶形式rhTRAIL 对肿瘤细胞有明显的生长抑制作用,该工作为进一步研究开发rhTRAIL奠定了一定的基础.

关键词：TRAIL、发酵、纯化、生物活性

所属期刊栏目：12

分类号：R73(肿瘤学)

在线出版日期：2008-06-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：297-299