日本血吸虫14-3-3蛋白质编码基因在原核细胞中的表达

摘要：

目的:为了寻找日本血吸虫病新的诊断和候选疫苗分子,克隆日本血吸虫14-3-3蛋白质编码基因,并进行表达.方法:提取日本血吸虫成虫RNA,设计合成引物,用RT-PCR法扩增出日本血吸虫14-3-3抗原(Sj14-3-3)基因编码序列,将其克隆入pGEM-T载体,然后在真核表达载体pBKCMV中亚克隆,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE观察表达结果.结果:RT-PCR法扩增出一条大小约765 bp的特异性片断,克隆质粒pGEM-Sj14-3-3和真核表达质粒pBKCMV经双酶切和以重组质粒为模板进行PCR扩增,均可获得一条与PCR产物一致的DNA片段,诱导表达后,经SDS-PAGE可见一条约32.5 kDa大小的融合蛋白条带.结论:本实验成功地克隆了日本血吸虫14-3-3抗原的编码基因,并在原核细胞中进行表达,为进一步的免疫诊断和核酸疫苗研究奠定了基础.

关键词：日本血吸虫、14-3-3蛋白质、基因克隆

所属期刊栏目：22

分类号：R383.24(医学寄生虫学)

资助基金：安徽省自然科学基金;安徽省教育厅自然科学研究项目

在线出版日期：2004-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：5-7